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重點(diǎn)培育項(xiàng)目
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碧云天的BeyoMag?磁珠法DNA凝膠回收試劑盒(DNA Gel Extraction Kit with Magnetic Beads)是一種使用新型核酸純化介質(zhì)包被的磁珠，用于穩(wěn)定、高效、便捷地從DNA瓊脂糖凝膠(agarose gel) 中回收目的DNA的試劑盒。
本試劑盒適合PCR產(chǎn)物、質(zhì)粒DNA酶切出來(lái)的DNA片斷、超螺旋質(zhì)粒DNA單酶切后的線性化產(chǎn)物或DNA連接產(chǎn)物等在瓊脂糖凝膠電泳后切膠產(chǎn)物的回收。純化所得DNA可直接用于酶切、連接、轉(zhuǎn)化細(xì)菌、測(cè)序、PCR、雜交等后續(xù)操作。
本試劑盒的原理和主要操作過(guò)程如圖1所示。瓊脂糖凝膠在融膠液中迅速融解，DNA充分釋放，再與磁珠特異性結(jié)合，在外界磁場(chǎng)(如磁分離架)的作用下，磁珠與相應(yīng)溶液可以快速而高效地分離，經(jīng)洗滌充分除雜質(zhì)，最后用洗脫液將DNA從磁珠上洗脫下來(lái)，即可獲得高純度的目的DNA樣品。
圖1.BeyoMag?磁珠法DNA凝膠回收試劑盒回收原理示意圖。
本試劑盒具有融膠速度快、操作靈活便捷、回收效率高、純度好、可回收DNA片段大小范圍廣等優(yōu)點(diǎn)。根據(jù)實(shí)際狀況靈活調(diào)節(jié)磁珠用量，通常20分鐘內(nèi)即可完成目的DNA片段的回收。適用于100bp以上DNA片段的純化，對(duì)達(dá)到10kb片段DNA的純化也能保持較好的效果。通?；厥章蔬_(dá)到60-80%，對(duì)200bp以下小片段和10kb以上大片段的回收率有所下降。本試劑盒對(duì)不同產(chǎn)物及分子量DNA的凝膠回收效果見(jiàn)圖2。
圖2.BeyoMag?磁珠法DNA凝膠回收試劑盒的效果圖。DNA Marker (D0107)、5.6kb或2.8kb的單酶切的產(chǎn)物、1kb或190bp的PCR產(chǎn)物經(jīng)本試劑盒凝膠回收前后的比較。注：M：Marker；B (Before)：凝膠回收前；A (after)：凝膠回收后。實(shí)際回收效果會(huì)因?qū)嶒?yàn)條件、操作等而存在一定差異，本圖僅供參考。
目前凝膠DNA回收的方法主要為柱回收法。該方法通常需要反復(fù)離心，或者需要特殊的抽濾裝置，而且柱純化過(guò)程中的纖維切割對(duì)大片段DNA回收不太有利。而磁珠法條件溫和，整個(gè)操作步驟無(wú)需繁瑣的反復(fù)離心或抽濾操作，而以簡(jiǎn)單的磁鐵吸附所代替，因而確保了操作的快速和便捷。
本試劑盒和傳統(tǒng)的純化方法相比，操作過(guò)程中不涉及酚/氯仿等有毒試劑。
本試劑盒的融膠液緩沖能力較強(qiáng)，經(jīng)測(cè)試不會(huì)因融膠而出現(xiàn)體系pH變化幅度大而導(dǎo)致DNA與磁珠結(jié)合能力下降的情況，因此體系中無(wú)需添加甲酚紅指示劑進(jìn)行特定情況的糾正。
對(duì)于體積不超過(guò)400mg凝膠樣品，本試劑盒的小包裝(S)和中包裝(M)分別可用于50次和200次DNA凝膠樣品的回收。
包裝清單：| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
| D0043S-1 | BeyoMag?磁珠 | 1.5ml |
| D0043S-2 | 溶液I (融膠液) | 20ml |
| D0043S-3 | 溶液II (洗滌液) | 26ml (第一次使用前加入39ml乙醇) |
| D0043S-4 | 溶液III (洗脫液) | 5ml |
| — | 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
| D0043M-1 | BeyoMag?磁珠 | 6ml |
| D0043M-2 | 溶液I (融膠液) | 80ml |
| D0043M-3 | 溶液II (洗滌液) | 52ml×2(第一次使用前每瓶加入78ml乙醇) |
| D0043M-4 | 溶液III (洗脫液) | 20ml |
| — | 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
室溫保存，一年有效。其中BeyoMag?磁珠長(zhǎng)期不使用時(shí)，可以4℃保存，4℃可以保存更長(zhǎng)時(shí)間。
注意事項(xiàng)：需自備無(wú)水乙醇和磁分離裝置，推薦使用碧云天的BeyoMag?磁分離架系列產(chǎn)品(FMS004、FMS008、FMS012、FMS016或FMS024)。
第一次使用前在每瓶溶液II (洗滌液)中加入指定量的無(wú)水乙醇，混勻，并在瓶上做好標(biāo)記。
磁珠懸液在靜置后會(huì)發(fā)生沉降，使用前一定要渦旋震蕩或顛倒數(shù)次至充分混勻后再使用。
磁分離前應(yīng)適度震蕩離心管使磁珠充分分散后再靠近磁場(chǎng)。如果出現(xiàn)磁珠掛壁現(xiàn)象，可以在磁珠聚集后晃動(dòng)管內(nèi)液體，使掛壁的磁珠流下。
本產(chǎn)品適用于手工抽提，也可用于工作站或核酸自動(dòng)提取儀。
為提高回收效率，電泳時(shí)最好更換電泳液并適當(dāng)降低電壓以避免電泳過(guò)程中溶液發(fā)熱，切膠時(shí)應(yīng)盡量減少紫外照射時(shí)間以減少DNA損傷并盡可能割除不含DNA的凝膠部分。
可用去離子水代替洗脫液進(jìn)行洗脫，但去離子水的pH不應(yīng)低于6.5，如偏低可用低濃度NaOH溶液調(diào)節(jié)至7.5-8.5。
溶液I (融膠液)對(duì)人體有一定的刺激性，操作時(shí)請(qǐng)小心，并注意適當(dāng)防護(hù)。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
