以Masson染色為例進行說明
一、實驗原理
凡是間葉組織細胞都可產(chǎn)生網(wǎng)織纖維,也可產(chǎn)生膠原纖維,纖維母細胞是產(chǎn)生膠原纖維的主要細胞。膠原纖維是結(jié)締組織中的主要纖維,是結(jié)締組織中起支持作用的重要部分,具有一定的韌性和堅固性,能抵抗一定的牽引力而不致撕裂。膠原纖維是原膠原互相錯開1/4平行排列交聯(lián)成膠原原纖維,膠原原纖維再聚合成較寬的結(jié)構(gòu)。按膠原的化學(xué)成分可分為15種,間質(zhì)中的膠原纖維主要由I、Ⅱ、Ⅲ型膠原組成,新鮮時呈白色,故又稱為白纖維。在HE染色中呈均一的粉紅色,與周圍間質(zhì)區(qū)分不是很清楚。染色后,便可明顯區(qū)別開來,易于觀察病變時膠原纖維的變化。
為了顯示與確定組織或細胞中的正常結(jié)構(gòu)或病理過程中出現(xiàn)的異常物質(zhì)、病變及病原體等,需要分別選用相應(yīng)的顯示這些成分的染色方法進行染色。包括:膠原纖維染色(Masson等)、網(wǎng)狀纖維染色、彈力纖維染色、肌肉組織染色(磷鎢酸蘇木素)、脂肪染色(蘇丹III)、糖原染色(PAS)、粘液染色(PAS)等。
Masson三色染色:膠原纖維藍色(苯胺藍復(fù)染)或綠色(亮綠復(fù)染),肌纖維、纖維素紅色,紅細胞呈橘紅色。
應(yīng)用:
1) 器官硬化性疾病的觀察:如肝硬變、心肌瘢痕的觀察,膠原染色更易于觀察診斷。
2) 瘢痕與淀粉樣物質(zhì)鑒別:前者膠原纖維染色為陽性,后者為陰性。
3) 骨纖維異常增殖病與骨纖維化的鑒別:利用膠原纖維染色可較易觀察前者膠原纖維紊亂,縱橫交錯,后者較規(guī)則。
五、案例展示
六、 常見問題
1、染色易脫片
① 組織本身破碎或過硬等,用防脫載玻片解決;
② 脫水、透明不足,重新脫水透明浸蠟;
③ 脫水、透明過度,用酒精甘油各半浸泡切面后再切片。
④ 切片過厚,厚薄均勻切片。
2、切片染色不均
① 取材固定不當(dāng),取材規(guī)范標(biāo)準,固定徹底;
② 脫水不夠,重新脫水、透明、浸蠟。
3、切片染色模糊不清
① 包埋蠟溫度過高;
② 分化過度;
③ 脫水透明不徹底。
七、服務(wù)流程
病理學(xué)檢測
分子生物學(xué)檢測
免疫學(xué)檢測服務(wù)
細胞實驗服務(wù)
動物實驗平臺