DEAE-Dextran細胞轉染試劑盒(DEAE-Dextran Transfection Kit)是一種適合于把DNA轉染到培養(yǎng)的真核細胞中的轉染試劑盒。
關于DEAE-dextran的細胞轉染方法早在1968年就有相關論文發(fā)表。DEAE-dextran可以促使DNA結合到細胞膜上，然后通過內吞作用(endocytosis)進入細胞?；贒EAE-dextran的細胞轉染方法適用于瞬時轉染(transient tranfection)，但不適用于篩選穩(wěn)定表達細胞株。DEAE-dextran在較高濃度作用較長時間會對細胞產(chǎn)生一定毒性。
目前基于DEAE-dextran的細胞轉染方法有兩種，一種方法為把DNA和DEAE-dextran混合后加入到細胞中，另一種方法為先用DEAE-dextran預處理細胞，然后再加入DNA。后一種方法是在前一種方法的基礎上經(jīng)過改進而產(chǎn)生的，對于一些細胞包括Hela、COS、NIH3T3和KB細胞等，后一種方法可以增加細胞對DNA的攝入量，顯著改善轉染效果。氯喹的加入可以抑制溶酶體對外源DNA的降解，從而提高轉染效率。但對于具體的細胞、具體的培養(yǎng)條件，如需獲得更加理想的轉染效率，必須自行摸索上述各種轉染方法，找出優(yōu)化的轉染方法。
基于DEAE-dextran的細胞轉染方法不僅可以轉染貼壁細胞，也可以轉染懸浮細胞。
轉染效率可以通過轉染表達EGFP或其它熒光蛋白的質粒進行快速鑒定。
關于不同的細胞轉染試劑的主要特點和差異方面的比較，以及如何選擇適當?shù)募毎D染試劑，可參考碧云天的相關網(wǎng)頁：http://www.beyotime.com/transfection.htm。
對于六孔板而言，一個包裝的本轉染試劑如使用常規(guī)方法可以轉染2500個孔，如使用預處理方法可以轉染200個孔。
包裝清單：
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
| C0511-1 | DEAE-Dextran溶液 | 20ml |
| C0511-2 | 10XPBS | 20ml |
| C0511-3 | 氯喹溶液 | 3.5ml |
| － | 說明書 | 1份 |
保存條件：
4℃保存，一年有效。
注意事項：
使用高純度的DNA或RNA有助于獲得較高的轉染效率。對于質粒，可以使用碧云天生產(chǎn)的質粒大量抽提試劑盒(D0026)進行抽提，以保證獲得較高的轉染效率。
轉染前細胞必須處于良好的生長狀態(tài)。
試劑盒中各試劑均經(jīng)過無菌處理，可以直接使用。在細胞轉染過程中要嚴格注意無菌操作。
需自備用于洗滌的PBS或HBSS，以及用于稀釋10XPBS的無菌水。
稀釋或配制DEAE-Dextran溶液或DNA的1XPBS可以用試劑盒中提供的10XPBS稀釋。
氯喹溶液對人體有害，請注意適當防護。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
